動(dòng)物疾病模型在人類重大疾病研究和新藥創(chuàng)制等方面具有不可替代的重要作用和價(jià)值。與自發(fā)性疾病動(dòng)物模型和環(huán)境誘導(dǎo)、物理因素、藥物誘導(dǎo)的疾病動(dòng)物模型相比，手術(shù)模型操作復(fù)雜、技術(shù)門檻高，因此也存在相應(yīng)的一些問(wèn)題，如缺乏標(biāo)準(zhǔn)化流程、穩(wěn)定性差、實(shí)驗(yàn)室之間數(shù)據(jù)可比性較差。即便是同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，重復(fù)性也是一個(gè)很大的挑戰(zhàn)。所以實(shí)現(xiàn)手術(shù)疾病模型的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化和重復(fù)性仍然是該領(lǐng)域長(zhǎng)期的目標(biāo)。針對(duì)這一現(xiàn)狀，賽業(yè)生物利用多年積累的的堅(jiān)實(shí)經(jīng)驗(yàn)、高效的團(tuán)隊(duì)組建及管理經(jīng)驗(yàn)，歷經(jīng)兩年籌備，打造了一支技術(shù)過(guò)硬的小鼠手術(shù)模型服務(wù)團(tuán)隊(duì)，熟練掌握多種模型的制備，具備建立復(fù)雜及復(fù)合手術(shù)疾病模型的能力。我們以項(xiàng)目“可重復(fù)”作為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于客戶復(fù)雜的項(xiàng)目需求或文獻(xiàn)未見(jiàn)、少見(jiàn)的疾病模型，我們會(huì)與客戶緊密協(xié)作，認(rèn)真理解和把握需求，制定科學(xué)合理的手術(shù)模型造模方案。希望我們提供的專業(yè)且穩(wěn)定的手術(shù)模型服務(wù)可以節(jié)省您的時(shí)間和精力，讓您可以聚焦到科學(xué)創(chuàng)新性的工作上來(lái)。服務(wù)優(yōu)勢(shì)1.以實(shí)驗(yàn)“可重復(fù)”作為服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)我們以實(shí)驗(yàn)“可重復(fù)”作為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)技術(shù)團(tuán)隊(duì)進(jìn)行大量的手術(shù)模型操作訓(xùn)練，確保疾病模型多個(gè)批次之間數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性。2.一站式服務(wù)。裸鼠皮下成瘤：前肢近腋后皮下注射細(xì)胞懸液； 裸鼠原位瘤：胰腺成瘤；尾靜脈注射成瘤。上海高脂高糖動(dòng)物模型建模

基于表型的藥物開(kāi)發(fā)(PBDD)：目前已重新替代藥物發(fā)現(xiàn)平臺(tái)，該方法更加依賴于動(dòng)物模型和TBDD的藥物鑒定和發(fā)現(xiàn)結(jié)果，之后進(jìn)行二次篩選。（2）基于靶標(biāo)的藥物開(kāi)發(fā)(TBDD)：明確藥物作用的特定分子靶標(biāo)，大多數(shù)藥物在開(kāi)發(fā)適應(yīng)癥時(shí)常采用此方法。臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室物種、菌株和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物）研究可為臨床研究提供技術(shù)和科學(xué)基礎(chǔ)，是發(fā)現(xiàn)和開(kāi)發(fā)藥物的基礎(chǔ)，有助于改善人類健康。同時(shí)，新模型的開(kāi)發(fā)和現(xiàn)有模型的改進(jìn)也十分重要，如在基因靶標(biāo)識(shí)別和驗(yàn)證、藥物開(kāi)發(fā)中CRISPR-Cas9的應(yīng)用，計(jì)算生物學(xué)，藥物篩選模型中的無(wú)脊柱動(dòng)物等等。上海乳鼠動(dòng)物模型飼養(yǎng)慢性阻塞性肺疾病是一種具有氣流阻塞特征的慢性和（或）肺氣腫。

微波爐中融化后制成1％的瓊脂糖膠。取10μlpcr產(chǎn)物于加樣孔中，120v恒壓瓊脂糖電泳15min.用凝膠成像系統(tǒng)成像。圖4中a上方是gm20541條件性敲除鑒定結(jié)果，wt表示野生型對(duì)照，條帶大小為223bp；het表示雜合子，有兩個(gè)條帶223bp和358bp；sixko表示純合子，條帶大小為358bp。圖4中a下方是six3－cre鑒定結(jié)果。six3－cre大小為200bp。根據(jù)圖4中a的結(jié)果，顯示所采用的鑒定方法可對(duì)新生小鼠的基因型進(jìn)行有效鑒定。其中，gm20541基因敲除純合子小鼠即可作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型(后文用sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子)，并進(jìn)行相關(guān)表型的驗(yàn)證。(5)rt-pcr實(shí)驗(yàn)分析six3-cre敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率驗(yàn)證，方法如下：(a)分別分離野生型和突變型小鼠視網(wǎng)膜組織，置于，加入1mltrizol提取液，室溫20分鐘；(b)加入200μl氯仿，充分混勻，室溫靜置10分鐘；(c)將樣品置于4度離心機(jī)，10000轉(zhuǎn)離心15分鐘；(d)小心吸取上清液，加入等體積異丙醇，充分混勻，10000轉(zhuǎn)離心沉淀rna；(e)75％乙醇清洗析出的總rna，離心再次沉淀，然后晾干加入depc水溶解；(f)提取的總rna用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用，采用該構(gòu)建方法可以得到視網(wǎng)膜色素變性疾病模型，該模型可表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病特征，該模型可用于視網(wǎng)膜色素變性性疾病的研究，可以幫助闡明rp的發(fā)病過(guò)程及機(jī)制，并為該疾病的或預(yù)防提供新的靶標(biāo)。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的：方面，本發(fā)明實(shí)施例提供了一種利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法，其包括：敲除目標(biāo)動(dòng)物視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中的基因組中的gm20541基因。znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子，對(duì)基因調(diào)控起重要的作用。znf124蛋白可穿過(guò)核孔進(jìn)入核內(nèi)，作為轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控其他基因的表達(dá)。目前針對(duì)znf124蛋白功能的研究報(bào)道并不多，對(duì)其功能也知之甚少，znf124與一種先天性系統(tǒng)發(fā)育疾病dandy-walker復(fù)合征(dandy-walkercomplex，dwc)相關(guān)。此外，znf124被認(rèn)為參與了前體生長(zhǎng)因子(vegf)對(duì)人造血細(xì)胞凋亡的抑制作用，表明znf124在人體生命活動(dòng)中承擔(dān)有重要功能。發(fā)明人的另一研究表明，znf124基因突變與rp有關(guān)，對(duì)探索rp的致病機(jī)制有極大幫助。因此，深入研究znf124對(duì)視網(wǎng)膜色素變性疾病的及病因探討潛力巨大。故大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型被用于局灶性腦缺血的研究。

實(shí)驗(yàn)試劑噁唑酮、橄欖油、無(wú)水乙醇、1mL注射器、軟管（可用膽汁插管的軟管）、渦旋儀2、試劑配制配制橄欖油與**比例為1:4（v:v）的均勻混合溶液用水稀釋無(wú)水乙醇得到50%乙醇稱取一定量的噁唑酮，使用橄欖油/**混合液溶劑，配置成3%的噁唑酮給藥溶液或者用50%的無(wú)水乙醇配制得到1%的噁唑酮給藥溶液。配制橄欖油與**比例為1:4（v:v）的均勻混合溶液用水稀釋無(wú)水乙醇得到50%乙醇稱取一定量的噁唑酮，使用橄欖油/**混合液溶劑，配置成3%的噁唑酮給藥溶液或者用50%的無(wú)水乙醇配制得到1%的噁唑酮給藥溶液。膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型。上海乳鼠動(dòng)物模型飼養(yǎng)

脂多糖（LPS）聯(lián)合煙熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。上海高脂高糖動(dòng)物模型建模

上海研錄生物科技有限公司無(wú)論是自發(fā)還是誘發(fā)模型，都能夠較好的復(fù)制AD相關(guān)的病理及生理特征，但是昂貴的費(fèi)用與稀少的資源限制了非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的大量應(yīng)用。嚙齒類動(dòng)物雖然在病變模擬方面不如非人靈長(zhǎng)類，但是具有價(jià)格低廉、資源、生存率高等特點(diǎn)，與人類的腦部解剖結(jié)構(gòu)與生理特征也較為相近，更適于誘導(dǎo)模型的大量制備，成為AD應(yīng)用的動(dòng)物模型。許多AD小鼠模型的背景品系是C57BL/6J小鼠，然而這種品系的小鼠似乎對(duì)類似AD的神經(jīng)病理學(xué)具有特別的抵抗力。上海高脂高糖動(dòng)物模型建模